NK-92MI(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者NK细胞)

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SKU: SNL-195 分类: 标签: 收录: 中科院NCACC培养基: 1640+10% FBS+1% P/S来源: NK细胞;淋巴瘤;男性;50岁规格: 1×10⁶cells/T25培养瓶

一、NK-92MI细胞基本属性

细胞名称 NK-92MI(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者NK细胞)
细胞别称 NK-92MI;NK-92mi;NK92-MI;NK92MI;NK-92transfectedwithMFG-Hil2
细胞货号 SNL-195
来源 NK细胞;淋巴瘤;男性;50岁
细胞形态 淋巴母细胞样
细胞类型 肿瘤细胞
生长特性 悬浮细胞
收录 中科院NCACC
生物安全等级 2
致瘤性
培养条件 1640+10% FBS+1% P/S
培养环境 37℃;5% CO2;饱和湿度
细胞简介 NK-92细胞是从一位患有急进性非霍奇金淋巴瘤的50岁白人男性外周血单核细胞衍生来的一株IL-2依赖型NK细胞株。NK-92MI细胞是转染得到的源自NK-92细胞的IL-2非依赖的NK细胞株,亲本细胞NK-92通过微粒体基因转化法用逆转录病毒MFG-hIL-2载体携带的人IL-2cDNA进行转化,可能由于载体整合到基因组DNA中,转化是稳定的。NK-92MI细胞细胞对很多恶性细胞有细胞毒性;铬释放试验显示它能杀死K562细胞和Daudi细胞。NK-92细胞有以下特征:CD2、CD7、CD11a、CD28、CD45、CD54表面标记阳性;CD1、CD3、CD4、CD5、CD8、CD10、CD14、CD16、CD19、CD20、CD23、CD34和HLA-DR表面标记阴性。NK-92MI细胞和NK-92CI细胞这两个变种都包含、表达并合成hIL-2cDNA。NK-92MI细胞合成的IL-2水平比NK-92CI高,而亲本细胞不合成表达。1998年9月提交到ATCC的培养物污染了支原体,其后代通过BM细胞周期蛋白处理21天消除支原体,处理后6周,用Hoechst染色、PCR和标准培养测试进行支原体检测,结果都呈阴性。

二、NK-92MI细胞培养操作

换液周期 2-3天
培养基体积 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法 1.混匀细胞,收集细胞培养基,900rpm离心3-5min,弃上清;
2.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
3.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项 部分悬浮细胞会附着瓶底,轻轻晃动培养基或者吹打细胞面就会脱落,不需要胰酶消化。
建议使用培养皿培养,更适合吹打细胞操作,吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

三、NK-92MI细胞冻存操作

冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格 200-300万/ml,1ml每管
冻存方法 1.离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80 度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20 度静置 2h 后转入-80 度过夜,第二天转入液氮保存。
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

Tips:1.细胞增殖偏慢,均为悬浮生长,大部分细胞聚集成团,少数分散的细胞,并且细胞间隙会有较多的死细胞和细胞碎片; 2.该细胞对温度,吹打力度,培养条件均很敏感;培养基、PBS等建议复温至37℃再使用,吹打力度过大容易造成大量细胞死亡; 3.该细胞对培养基及血清要求较高,强烈建议选择尚恩生物NK92-MI专用培养基(货号SNLM-195)培养; 4.该细胞冻存难度较大,建议使用90% FBS+10%DMSO冻存液配方冻存; 5.该细胞复苏时建议将血清浓度提高至20%,待细胞可以正常聚集生长后再将血清浓度恢复至10%; 6.建议悬浮细胞密度维持在1E5-5E5/mL之间,密度过低或者过高可能会影响细胞状态;

我们推荐使用尚恩生物 人恶性非霍奇金淋巴瘤患者NK细胞专用培养基(产品货号:SNLM-195)作为NK-92MI(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者NK细胞)的专用培养基。

NK-92MI(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者NK细胞)收货处理方式

NK-92MI(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者NK细胞)培养操作说明

NK-92MI(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者NK细胞)售后规定

NK-92MI(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者NK细胞)STR分型结果及匹配其细胞库信息
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细胞基因分型图谱
NK-92MI(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者NK细胞)细胞基因分型图谱