一、SP2/0细胞基本属性 |
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| 细胞名称 | SP2/0(小鼠骨髓瘤细胞) |
| 细胞别称 | SP2/0-Ag14; SP2/0-AG14; SP2/0-ag14; Sp2/O-Ag14; SP2/O-Ag14; Sp2/0-Ag-14; SP2-0-Ag14; SP2/0 Ag-14; SP-2/0-AG14; Sp 2/0-Ag 14; SP2/0-Ag14; Sp2/0; Sp2/O; SP2/O; SP-2; SP2; GM03569; GM3569; GM03569B; GM3569B; GM03569D |
| 细胞货号 | SNL-120 |
| 来源 | 骨髓瘤；BALB/c；雌性 |
| 细胞形态 | 淋巴细胞样 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 生长特性 | 半贴壁细胞 |
| 收录 | ATCC |
| 生物安全等级 | 1 |
| 致瘤性 | |
| 培养条件 | IMDM+10% FBS+1% P/S |
| 培养环境 | 空气，95% ； 二氧化碳 (CO2)，5% |
| 细胞简介 | SP2/0细胞是一株小鼠骨髓瘤细胞，是通过将BALB/c脾细胞（来自用绵羊RBC免疫的小鼠）与P3X63Ag8骨髓瘤融合而形成的。SP2/0细胞HGPRT缺失，对8-氮杂鸟嘌呤有抗性，对HAT敏感，不生成免疫球蛋白。SP2/0细胞可以用于3D细胞培养和生物制品生产。 EXPASY细胞库别称证实该细胞与SP2/0-AG14（SNL-187）是同一株细胞，尚恩生物针对SP2/0-AG14细胞定期进行20ug/ml 8-氮鸟嘌呤（8AG）筛选，避免细胞出现返祖现象，经尚恩生物单抗制备实验证实更适合小鼠单抗制备。 |
二、SP2/0细胞培养操作 |
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| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.轻轻吸走培养上清，留2-3ml培养基轻轻吹打细胞面吹下细胞； 2.混匀细胞，收集细胞培养基，900rpm离心3-5min，弃上清； 3.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 4.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、SP2/0细胞冻存操作 |
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| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 |
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
Tips：1.细胞半贴壁圆形生长，部分悬浮圆形，传代时均可收集培养，换液时将悬浮细胞离心收集后重新接回原瓶，若贴壁细胞较多活性较好时可以不要悬浮的细胞； 2.传代有部分细胞碎片可以换液后用PBS润洗细胞清除，使用的PBS需要恢复到室温，加入时不要冲到细胞面，润洗尽量轻柔； 3.该细胞生长较快，培养基消耗较快，培养时注意密切关注细胞状态，密度较高、培养基有变黄趋势时及时换液避免细胞状态变差；
我们推荐使用尚恩生物 小鼠骨髓瘤细胞专用培养基（产品货号：SNLM-120）作为SP2/0(小鼠骨髓瘤细胞)的专用培养基。
