| 产品名称 | 细胞周期检测试剂盒（DNA含量检测，PI红色荧光） |
| 货号 | SNK-015 |
| 规格 | 20T/50T/100T |
| 简介 | 细胞周期（cell cycle）是指连续分裂细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程。在这个过程中,细胞遗传物质复制并加倍,且在分裂结束时平均分配到两个子细胞中去。细胞周期可以分为分裂间期（interphase）和有丝分裂期(M phase)，其中分裂间期又可以细分为休眠期（G0）,DNA合成前期（G1）,DNA合成期（S）,DNA合成后期（G2）。细胞各个时期其DNA含量不同。 本公司细胞周期检测试剂盒采用DNA含量分析法，通过流式细胞术测定DNA含量进行细胞周期分析，确定不同时期的细胞群百分比。其原理是利用细胞内DNA能够和某些特定荧光染料（如PI，DAPI等）特异性结合，并对其进行标记，含量检测。结合的荧光染料的强度与DNA含量呈正比，通过流式细胞仪检测荧光强度即可反映细胞周期各个阶段的细胞比例情况。检测时，先对细胞进行固定或通透，再用染料如碘化丙啶（PI）孵育，然后通过流式细胞仪进行分析。PI信号的荧光强度与DNA含量呈正比。DNA含量的直方图可以估计G1/G0、S和G2/M期的细胞数量。 本试剂盒可以检测贴壁细胞、悬浮细胞的细胞周期检测。 |
| 使用方法 | 1.准备工作 A．无水乙醇-20°C冰箱过夜。 B．RNase A Reagent溶解后混匀,冰浴备用。 2.样本处理 1）按实验方案对细胞进行处理后,收集约5×105个细胞； 2）300×g离心5 min,弃上清； 3）加入1 mL PBS洗涤,300×g离心5 min,弃上清； 4）加入0.3 mL的PBS重悬细胞； 3.逐滴加入0.7 mL的-20°C无水乙醇,充分混匀后置于-20°C冰箱中1h或过夜； 4.300×g离心5 min,弃上清,加入1 mL的PBS重悬细胞,室温放置15 min； 5.300×g离心5 min,弃上清,加入100μL的RNase A Reagent并充分悬浮细胞,37°C水浴30min； 6.加入400μL的PI溶液并充分混匀,2-8°C避光孵育30 min； 7.立即上机检测，记录激发波长488nm，发射波长617nm处的荧光信号； |
| 产品组分 |  |
| 存储条件 | RNase A溶液适当分装后-20°C保存。PI溶液2-8°C避光保存。 |
| 保质期 | 保质期1年,为获得最佳的使用效果,请在3-6个月内使用。 |
注意事项：
1.实验结果需用流式细胞仪进行检测。
2.荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光。
3.PI溶液对人体有刺激,操作时请小心,并注意适当防护以免直接接触人体或吸入体内。
4.本产品仅限于专业人员的科学研究用。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
