Foxp3转录因子染色固定及破膜试剂盒(流式用)

Foxp3转录因子染色固定及破膜试剂盒(流式用)是一款经过优化的专门针对转录因子、核蛋白(例如 Foxp3 和 STAT3)等流式抗体进行细胞核内抗原染色时所用的固定、破膜试剂。

货号: SNAR-003 分类:
产品名称 Foxp3转录因子染色固定及破膜试剂盒(流式用)
货号 SNAR-003
规格 20T
简介 该产品是一款经过优化的专门针对转录因子、核蛋白(例如 Foxp3 和 STAT3)等流式抗体进行细胞核内抗原染色时所用的固定、破膜试剂。
使用方法 一、试剂准备
1.本试剂盒中 Fixation Concentrate (4×)为 4×浓缩液,实验前用 Fixation Dilution Solution 稀释成 1×Fixation Working Solution。
2.本试剂盒中 Permeabilization Buffer (10×)为 10×浓缩液,实验前加去离子水稀释成 1×Permeabilization Working Solution。
二、实验步骤
1.取 100 μL 细胞/管(约 1×106 个细胞)于流式管内。
2.[可选步骤] 根据说明书进行 Fixable Viability Dye(死活细胞鉴定染料)染色。
3.[可选步骤] 根据实验需求对细胞悬液进行 Fc 受体封闭。
4.按照抗体说明书加荧光标记抗体染细胞表面 Marker。
5.孵育完成后加入 1 mL 细胞染色缓冲液[SNAR-001],300g 离心 5min,弃上清,再加入 100 uL 细胞染色缓冲液[SNAR-001]重悬细胞。
6.加入 1 mL 1×Fixation Working Solution,涡旋混匀,4℃反应 30min,反应完后,600×g 离心 5min,弃上清。
7.加入 2 mL 1×Permeabilization Working Solution,涡旋混匀,600×g 离心 5min,弃上清。
8.重复步骤 7。
9.加入 100 μL 1×Permeabilization Working Solution 重悬细胞。
10.按照抗体使用说明书加荧光标记的核染色抗体,混匀后室温避光孵育 30 min。
11.加入 2 mL 1×Permeabilization Working Solution,600×g 离心 5 min,弃上清。
12.加入适量细胞染色缓冲液[SNAR-001]重悬细胞,即可上机检测。
产品组分
存储条件 2-8°C
保质期 未开封条件下半年

注意事项:
1.Permeabilization Buffer (10×)有沉淀属于正常现象,不影响使用效果。
2.固定和破膜步骤可能会改变细胞的光散射特性,并可能增加非特异性背景染色。在染色过程中加入 BSA 或胎牛血清(FCS)等蛋白质可能有助于减少非特异性背景。此外,建议使用 Fixable Viability Dye(死活细胞鉴定染料),具体采用染料需要根据客户流式抗体配色决定,以帮助排除数据分析过程中的死细胞。
3.该产品仅供科研使用,不得用于诊断或临床实验。
4.为了您的安全和健康,请穿上实验服,戴上一次性手套。