实验指南 - 第 10 页 - 武汉尚恩生物技术有限公司

小鼠胚胎细胞原代培养的操作步骤和注意事项

原代细胞培养，是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官，在体外培养，直到第一次传代为止。这种培养，首先用无菌操作的方法，从动物体内取出所需的组织（或器官），经胰酶消化，分散成为单个游离的细胞，在人工条件下培养，使其不断地生长及繁殖。今天为大家详细介绍小鼠胚胎细胞原代培养的操作步骤和注意事项。

鸡胚原代细胞的培养操作步骤以及注意事项

原代培养是建立各种细胞系（株）必经的阶段，其是否成功与组织污染与否、供体年龄、培养技术和方法、适宜培养基的选择等多种因素有关。下面就为大家详细介绍一下鸡胚原代细胞的培养操作步骤以及注意事项。

细胞原代培养常规检查观察的4种方法

细胞在体外培养过程需要每天进行常规检查和显微镜观察，及时了解细胞生长状态、数量改变、细胞形态以及细胞有无移动、污染、培养基pH值是否变酸、培养基变黄是否需要更换等。细胞常规检查观察的方法有以下4种。

悬浮细胞传代实验所需材料以及操作步骤

体外培养的原代细胞或细胞株要在休外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，维持细朐种的延续。放平细胞瓶，当发现悬浮细胞长到瓶壁85%～90%时，从容器中取出细胞，以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为悬浮细胞的传代培养。

贴壁细胞传代培养实验步骤以及注意事项

细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，就必须进行传代（再培养）。传代培养是―种将细胞种保存下去的方法，同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以，而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。

3大生长特性细胞的传代方法

根据不同细胞采取不同的培养细胞传代方法。悬浮生长的细胞可以用直接吹打或离心分离后传代，或自然沉降法吸除上清后，再吹打传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁生长的细胞用直接吹打即可传代。

人结肠癌细胞SW480冻存的方法及注意事项

人结肠癌细胞SW480源自原位直肠腺癌，和SW620细胞源自同一病人一年后的淋巴结转移。CSAp和直肠抗体3阴性；角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。p53基因第273位密码子的G→A突变引起Arg→His替代，309位密码子的C→T突变导致Pro→Ser替代。人结肠癌细胞SW480不表达细胞溶解酶，一种与肿瘤入侵相关的金属蛋白酶。