实验指南 - 第 10 页 - 武汉尚恩生物技术有限公司

细胞原代培养常规检查观察的4种方法

细胞在体外培养过程需要每天进行常规检查和显微镜观察，及时了解细胞生长状态、数量改变、细胞形态以及细胞有无移动、污染、培养基pH值是否变酸、培养基变黄是否需要更换等。细胞常规检查观察的方法有以下4种。

悬浮细胞传代实验所需材料以及操作步骤

体外培养的原代细胞或细胞株要在休外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，维持细朐种的延续。放平细胞瓶，当发现悬浮细胞长到瓶壁85%～90%时，从容器中取出细胞，以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为悬浮细胞的传代培养。

贴壁细胞传代培养实验步骤以及注意事项

细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，就必须进行传代（再培养）。传代培养是―种将细胞种保存下去的方法，同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以，而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。

3大生长特性细胞的传代方法

根据不同细胞采取不同的培养细胞传代方法。悬浮生长的细胞可以用直接吹打或离心分离后传代，或自然沉降法吸除上清后，再吹打传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁生长的细胞用直接吹打即可传代。

人结肠癌细胞SW480冻存的方法及注意事项

人结肠癌细胞SW480源自原位直肠腺癌，和SW620细胞源自同一病人一年后的淋巴结转移。CSAp和直肠抗体3阴性；角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。p53基因第273位密码子的G→A突变引起Arg→His替代，309位密码子的C→T突变导致Pro→Ser替代。人结肠癌细胞SW480不表达细胞溶解酶，一种与肿瘤入侵相关的金属蛋白酶。

大鼠骨髓间充质干细胞冻存原理及常规冻存步骤

大鼠骨髓间充质干细胞（BMSC）分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑...

人肾小管上皮细胞HK-2的复苏操作步骤及注意事项

人肾小管上皮细胞HK-2属源于正常肾的近曲小管细胞，通过导入HPV-16 E6/E7基因而获得永生化。将含有HPV- 16 E6/E7基因的重组的逆转录病毒载体pL XSN 16 E6/E7转染外生包装细胞Psi-2；Psi-2细胞产生的病毒再去感染兼嗜性包装细胞系PA317，最后将PA317细胞产生的病毒颗粒导入正常的肾皮质近曲小管细胞。