常见问题

含血清冻存液基本成分是基础培养基、血清、DMSO三个，DMSO一般是5-10%之间，其他成分在不同实验室冻存液配方会有很大差异。对于新细胞或者操作不熟练的情况下，建议尽量提高血清浓度，提高血清浓度可以有效提高冻存细胞容错率从而提高细胞冻存存活率；对于经验比较丰富的情况下，可以使用细胞对应的完全培养基直接添加DMSO后用于冻存细胞。

真菌污染的细胞，培养基内肉眼可见真菌菌落，显微镜下观察可以看到真菌菌丝、菌落结构。真菌污染一般2-3天即可爆发至肉眼可见大量菌落的程度，真菌污染可能出现大规模传染现象，除及时处理污染的细胞以外，实验室...

细菌污染的细胞过夜培养后，培养基会显著变黄，培养瓶内肉眼可见细菌沉淀，晃动培养基会有浑浊现象，显微镜下观察细胞可以看到很细的沙状物覆盖整个培养瓶底部。

一般培养细胞所使用的血清不需要灭活，灭活会导致血清部分营养损失、沉淀增多，灭活的优势（主要是灭活补体以免影响细胞生长）在实际培养过程中对于促进细胞生长并没有太大意义。部分细胞对于生长条件敏感，可以尝试灭活血清培养，但大部分细胞并不需要。

血清沉淀主要是纤维蛋白等蛋白、磷酸盐、脂类等经冻融后析出，导致血清内出现沉淀现象，该现象与血清品质无关，大部分品牌的血清都会有这种情况，不会影响细胞培养，只是培养时可能偶尔观察到血清沉淀，注意区分血清沉淀和细胞污染即可。

含EDTA的胰酶消化活力会比不含EDTA的强，消化同种细胞时含EDTA的胰酶消化时间会比不含EDTA时间短，实际消化后细胞状态不会有太大差异，注意控制消化时间即可。

L-谷氨酰胺（L-Glutamine）是细胞代谢中一种重要的营养物质，其不仅是细胞的能量来源，还参与蛋白质合成和核酸代谢，?缺乏L-谷氨酰胺会导致细胞生长不良甚至死亡。

该类细胞注意接种密度不要过高否则极易成团，也可以使用多聚赖氨酸、胶原等包被过的培养瓶或者购买成品的高吸附培养瓶培养细胞，培养时可以适当提高血清浓度以促进细胞贴壁及增殖。