肿瘤细胞的特征 从肿瘤分离细胞可以产生几种不同类型的细胞系。除肿瘤细胞、结缔组织的成纤维细胞、血管的内皮细胞和平滑肌细胞外,浸润的淋巴细胞、粒细胞和巨噬细胞以及形成肿瘤的正常组织成分都能移植存活。尽管已从小细胞肺癌获得造血细胞系,但造血细胞很少形成细胞系。如果没有合适的生长因子和选择培养液,平滑肌细胞不容易扩增,故培养肿瘤细胞的主要潜在污染细胞是成纤维细胞、内皮细胞和肿瘤细胞的正常等同细胞。
细胞培养基需要更换的4个指标 无论是原代培养还是细胞系的传代培养,一旦培养开始,就要定期更换培养基或“饲养”,如果细胞增殖。随后迟早要进行传代培养。对干不增殖的培养物,也需要定期更换培养基,因为细胞仍会代谢,培养基的某些成分会耗尽或自然降解细胞传代间隔在不同细胞系中因生长速率和新陈代谢的不同而不同。
培养细胞中三大消化液详细介绍 消化液常在贴附型细胞原代培养或传代培养过程中用来分散组织或细胞团,以达到离散细胞,获得细胞悬液的目的。目前常用的消化液主要有胰蛋白酶消化液、胶原酶消化液以及乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)液。
动物细胞分离培养无菌操作前的准备工作 动物细胞分离培养室用无菌操作的方法将动物体内的组织(或器官)取出,模拟动物体内的生理条件,在体外进行培养,人们借以观察细胞的生长、增殖和细胞分化以及细胞凋亡或死亡的过程。因为分离的细胞没有免疫防御系统,所以动物细胞分离操作需要比外科手术更加严格的无菌操作,无菌操作的原则就是保证细胞分离过程中的操作环境,使用的器械、耗材以及试剂无菌。
如何绘制细胞生长曲线? 典型的生长曲线即可分为潜伏期、指数生长期、平顶期及退化衰老四个部分,其中的三个不同生长时期(潜伏期、指数生长期和平顶期)是每个细胞系所共有的特征。通过测定生长曲线,不仅可以了解培养细胞生物学特性的基本参数、测定细胞绝对生长数、判断细胞活力,而且也可用于测定药物等外来因素对细胞生长的影响。
传代细胞的常规培养 当原代培养成功以后,随着培养时间的延长和细胞不断分裂,一方面由于细胞密度过大,细胞与细胞之间相互接触而发生接触性抑制,生长速度减慢甚至停止将一方面也会因营养物枯竭和代谢物积累而不利于生长或发生中毒。因此需要将培养细胞进行分离扩大培养,细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶的这个过程称为传代或者再培养。
细胞培养用液的分装方法与要求 动物细胞培养中常用的液体有平衡盐溶液、消化液、pH调整液、抗菌素液、谷氨酰胺、肝素钠、蛋白酶抑制剂、培养基等。这些液体在配制时有如下要求:使用高纯化的三蒸水;保证各组分完全溶解;pH值测定和调整;消毒灭菌分装小瓶,抽样做无菌实验;配制细胞用液器材的清洁要求同细胞培养器材。那么细胞培养用液的分装方法与要求有哪些呢?