养出形态漂亮的细胞因素之培养瓶选择

细胞培养中,培养瓶的选择培养基的加入量是直接影响到细胞生长的要素。这里面又有什么门道呢?
关于选择培养瓶的问题,个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性塑料瓶相对好一些。而对于同一种细胞,在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比塑料瓶内好。这可能是因为塑料瓶比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在塑料瓶这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。
所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态,塑料瓶比玻璃瓶会好,对于生长速度慢的细胞,玻璃瓶则会更好。同样,对于同一种细胞,在其生长速度慢的时候,塑料瓶会好一点,比如刚刚复苏的时候,或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候,玻璃瓶则相对会好一点。
关于培养瓶内加入培养基的量的问题,这个是要靠自己去摸索自己所养的各个细胞的习性。并不是一味的小的玻璃方瓶就装12ml培养基,大方瓶就装14ml培养基。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。(可能也是竞争很大,有优胜劣汰吧。)对于生长速度快的细胞,易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是需要注意掌握换液频率。
另外,补充另外一个点,传代时PBS洗是很重要的一步。最近发现,用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟,有些需要更长的时间,等到细胞一个个分离开来的时候,就可以直接吹打下来,但是和胰酶消化一样,要控制好时间,不能时间太过了,要不然损伤细胞,细胞不容易成活,状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候,或者临时没有胰酶了,可以选用此方法。不过一定要试试,看是否适合你的细胞。

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