胰酶消化具体消化到什么程度终止比较合适？

胰酶消化细胞时消化时间过长或者过短都会对细胞造成损伤，轻则细胞传代死亡偏多，重则细胞传代完全不长、碎片增多逐渐死亡。因此需要尤其注意控制消化时间，建议让经验丰富的技术人员处理细胞，尤其是刚收货的细胞对于消化、吹打等操作更为敏感，操作不慎很容易出现问题。
大部分细胞消化到细胞间隙变大、形态回缩但未完全脱离培养瓶的情况时是最适的。客户如果对该细胞经验不多，无法准确掌控胰酶作用时间，建议客户按照下述操作：胰酶首先复温到室温后加入细胞，放入37度培养箱，然后每隔30秒，即吹打下细胞（此时吹打细胞应尽量轻柔，不能强行将细胞吹下，否则细胞可能出现机械损伤），如果能够吹打散细胞，说明细胞消化完成可以终止消化，如果30秒吹打不下，再等30秒重复操作。消化完成后加3-4ML完全培养基终止消化，混匀细胞，收集细胞悬液900-1000rpm离心3min，弃上清。
Tips：不同实验室胰酶活力差异、细胞状态及密度不同、培养容器差异等均会导致细胞消化时间不同，每次消化均应密切关注细胞消化状态避免细胞消化损伤。贴壁较弱的细胞应严格控制消化时间，贴壁较强的细胞消化时间控制会稍微松旷一点，消化传代后容易聚集成团的细胞可以略微延长消化时间以尽量吹散细胞。部分贴壁较强（消化时间大于5min）的细胞终止消化后会极快的重新贴壁导致加终止液前可以吹下但加入终止液后就无法吹下，这种情况可以在加终止液前直接吸取正在消化的胰酶先吹下细胞，再加终止液混匀终止消化。