开工大吉之细胞唤醒计划

春节假期已经结束,小伙伴们陆续开工,年前我们冻存的细胞可以准备复苏啦!
实验室的液氮罐里,那些在-196℃极寒中沉睡了一个假期的细胞们,正等待着被温柔唤醒。如同我们收拾心情重返工作岗位一样,这些细胞也需要一次精心的复苏过程,才能重新恢复活力,为新一轮的实验保驾护航。
细胞复苏看似简单,却是细胞培养中最关键的环节之一。操作不当,轻则细胞活力下降,重则全军覆没。今天,就让我们一起来回顾细胞复苏的标准操作流程和那些容易被忽视的细节,确保每一支冻存的细胞都能以最佳状态“开工大吉”。
细胞复苏前先打开培养箱电源,设置培养箱参数,补充水盘、检查CO2是否充足,确认设备是否能够稳定运行。检查生物安全柜、水浴锅、离心机等是否能正常运行。
细胞复苏操作指南!!
1.提前将水浴锅预热至37℃,预热培养基,离心机设置好转速;
2.捏住管盖,将细胞冻存部分浸入水浴锅迅速摇晃,严格控制细胞在2min内充分融化,不要留有冰块;
3.融化后将细胞悬液缓慢滴入提前加了3-4ml培养基的15mL离心管;
4.1000rpm 3min离心后弃上清,轻柔重悬细胞(吹打次数不超过10次)接种至一个T25瓶或者6cm皿,放入培养箱24小时后观察。
注意事项:
1.若液氮或冰箱距离水浴锅较远,细胞需要放在干冰或冰盒上运送至水浴锅。
2.水浴后观察还有较大冰块时要继续水浴直到融化。
3.培养瓶瓶盖需透气,没有透气孔的盖子拧松半圈。
新的一年,愿你的实验顺利,细胞活力满满,Paper多多,数据漂亮!让我们从复苏第一支细胞开始,共同开启科研新征程!

本网站所展示的所有内容,仅限于科学研究、科研或工业等非医疗目的,不得用于人类或动物临床试验、诊断或治疗等医疗目的