如何用多聚赖氨酸包被培养器皿?

多聚赖氨酸(Polylysine),是一种合成化合物,带正电荷,可以通过改变培养器皿表面的电极,有效促进细胞粘附,从而增强细胞与培养瓶的黏着性。


包被步骤
以T25瓶为例,处理方法如下:
1)配制10X母液,过滤除菌,放2-8℃冰箱待用。(也可以直接购买商品化的10X多聚赖氨酸溶液)
2)取母液,无菌条件下按所需量吸取包被液按1:10用无菌水稀释至工作浓度,稀释后的包被液轻轻晃动培养瓶使之均匀分布于瓶底。常用的工作浓度为0.1mg/mL,也可以根据实验需要调整浓度。
3)将培养瓶置于37℃培养箱静置1-2h
4)取出培养瓶,吸出多余包被液
5)培养瓶盖好,放入培养箱静置4h以上,尽量保证培养瓶底干燥,无液体
6)使用培养瓶前,加入10mL PBS润洗培养瓶并重复1-2次,以去除残余包被液成分,润洗完成即可正常接种细胞

不同培养容器的包被液用量

FAQs:
1.用过的包被液可以重复利用几次?
用过的多余包被液可以重复利用3-4次,尽量不要重复使用太多次。
2.包被好的器皿暂时不用怎么保存,可以保存多久?
若暂时不使用,可以将吸走包被液的培养器皿用封口膜封好,放4℃冰箱密封保存,建议一周内使用,保存时间过长可能影响使用效果。

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