细胞培养实验中含血清培养基的10大缺点

由于血清里面含有各种促成长因子和细胞生长发育所需要的营养物质促进细胞的生长,所以大多数细胞系培养需要用含血清的来培养,但是含有血清的培养基也有许多的缺点,下面就为大家介绍含有血清培养基主要的10大缺点。


1)生理变化。血清中的主要成分诸如白蛋白、转铁蛋白已经知道得很清楚,但是其中含有的大量微量成分对细胞生长也起到巨大作用。这些成分包括营养物质(氨基酸、核苷、糖等)、肽生长因子、激素、无机物、脂类,它们的含量和作用还没有完全确定。
2)储藏寿命和稳定性。每批血清都不同,最好的血清可保存一年,但也许那时它已经变质。如果已经变质就必须更换另一批相似的血清,但是用来更换的血清绝不会同第一批血清完全相同。
3)质量控制。更换血清时需做大量的测试以确保替换的血清与前一批血清最为相似,这包括用几种不同的细胞系做几项试验(如生长试验、贻瓶伞、特殊功能试验等)。
4)特异性。如果培养的细胞类型不止一种,每种细胞可能需要使用不同批号的血清,这将导致有同时保存不同批号的血清的需要。而用同一批血清同时培养不同类型的细胞将会带来更大的问题。
5)可利用率。由于牧区干旱、在牛群中疾病流行及政治或经济等原因会周期性地影响血清的供应,因此随时会产生许多问题,诸如限制可利用的血清数量和可选择的血清批数,尤其在血清需求量高的时候这种问题更为严重。现在,血清的需求量不断增加,很可能会超出供给量,除非大多数商业应用者采用无血清培养基。因为尽管一个普通的研究性实验室一年仅需要100~200L血清,但一个商业性生物科技实验室可以用等量或更多的血清。
6)后期加工。血清的存在对于纯化产物是一个主要的障碍,甚至可能影响产物的药物学效应。
7)污染。血清经常被病毒污染,其中许多可能对细胞培养有害,这是不受操作者控制的未知因素。令人高兴的是血清灭菌技术的改讲实际上已经避免了从正规厂家提供的血清感染支原体的可能,但病毒感染仍然是个问题,尽管有些供应商声称某些滤器可以去除病毒但这仍不能保证血清不被病毒感染。
8)价格。价格昂贵是血清培养基的缺点之一。确实,血清是一瓶培养基中最贵的成分(是化学成分价格的10倍多),但是如果用指定的成分来替换血清,那么这些成分的总价格和血清相当。然而,随着转铁蛋白、硒、胰岛素等市场需要量的不断增加,这些物质的价格很可能降低,无血清培养基也将会更便宜。而随着重组生长因子的实用性及市场需求的增加,也将有助于降低其价格。
9)生长抑制剂。血清不仅对细胞生长起促进作用,而且也起抑制作用。尽管通常情况下,血清的主要作用是激活细胞生长,但血清的总体效应是抑制和激活作用的总和。血清中的一些物质,如血小板生长因子(PDGF)可能是成纤维细胞的有丝分裂原,而其他成分可能抑制细胞的生长。存在于胎儿血清中含量约为1×10-8mol/L的氢化可的松在高细胞密度时对许多细胞如神经胶质细胞和肺上皮细胞起抑制作用(尽管在细胞密度低时可能起促进作用),血小板释放的TGF-β(转化生长因子-β)也可对许多上皮细胞起抑制作用。
10)标准化。由于每批血清均不相同,要在不同操作时间和不同的实验室,实现实验程序和生产程序的标准化极为困难。

本网站所展示的所有内容,仅限于科学研究、科研或工业等非医疗目的,不得用于人类或动物临床试验、诊断或治疗等医疗目的