支原体化学发光检测试剂盒(低灵敏度)

武汉尚恩生物生产的支原体化学发光检测试剂盒采用支原体特有酶检测法,通过裂解支原体,释放特有酶催化合成ATP,生产的ATP与试剂中的荧光素酶发生反应,通过比较反应前后荧光量变化确定样品中是否含有支原体污染。

SKU: SNA-002-1-1-1 分类: 标签: , ,
产品名称 支原体化学发光检测试剂盒(低灵敏度)
货号 SNCD-002
规格 20次/100次
简介 支原体(Mycoplasma)别名霉形体,直径0.1-0.3um,具有高度多样性,是一种没有细胞壁、可以用人工培养基培养增殖的最小的原核生物。其广泛存在于人和动物体内,大多数不致病。由于其广泛存在,外加体积较小可以通过滤膜混入细胞培养体系,也很难通过普通光镜观察到,普通抗生素对其也没有有效的抑制作用,因此成为细胞培养中比较常见而且难以检测清除的污染。
支原体污染对细胞会有多方面的影响,包括以下方面:1.细胞生长速度改变;2.细胞形态、状态改变;3.细胞染色体异常、突变甚至功能改变;4.细胞对环境冲击耐受力降低;5.相关细胞实验获得的数据异常等。可以说对细胞及细胞相关实验有极其严重的影响,因此检测及清除广泛存在的支原体污染成为诸多实验室必须要经历的过程。
支原体污染无法通过肉眼或者普通光镜直接判断,只能通过各种试剂、仪器检测。支原体常规检测方法有:荧光法、培养法、电镜法、常规PCR法、一步PCR法、化学发光法等,不同检测方法能够检测的支原体种类不同,其检测灵敏度、特异性、便捷性也有各自的特点。
本公司生产的支原体化学发光检测试剂盒采用支原体特有酶检测法,通过裂解支原体,释放特有酶催化合成ATP,生产的ATP与试剂中的荧光素酶发生反应,通过比较反应前后荧光量变化确定样品中是否含有支原体污染。该试剂盒可以有效、快速、灵敏的检测支原体污染,只需要少量样品即可检测支原体污染情况。
使用方法
  1. 客户需要自备的试剂、仪器

<1>待检测样品:细胞上清、血清或者培养基。

细胞上清建议使用培养细胞3-5天的上清,培养时间过短的上清支原体含量较低可能无法有效检出,血清或者培养基也应在培养箱静置培养1-2天使支原体有一定程度增殖再用于检测。

<2>必备仪器、试剂

  1. 化学发光相关:化学发光仪或可以检测化学发光的酶标仪、化学发光专用96孔板(建议使用白板,使用透明板可能因相邻孔光量影响导致读数严重不准)
  2. 通用:移液器、无菌Tip头、离心管、双蒸水等
  3. 实验步骤
  4. 在化学发光专用检测白板各孔中分别加入50ul待检样品、阴性对照、阳性对照(阳性对照按10ul添加,补加40ul双蒸水);
  5. 在各孔中分别加入50ul试剂A,混匀后20-25℃静置5min,用化学发光检测仪检测读数,检测结果即为反应前的读数A;
  6. 在各孔中再分别加入50ul试剂B,混匀后20-25℃静置10min,再用化学发光检测仪检测读数,检测结果即为反应后的读数B;

计算反应前后读数比值(Ratio)=读数B/读数A,具体比值结果分析参考下图;

SNCD-002比值结果

产品组分 SNCD-002产品组分
存储条件 -20℃(避免反复冻融)
保质期 -20℃一年(避免反复冻融)

注意事项:
1.该产品-20度可以保存一年以上,但反复冻融或保存不当可能会导致荧光素酶或阳性对照失效,如需多次使用,建议小量分装,分装时避免外源污染。
2.使用前应将各试剂、样品复温至20-25℃再使用,否则可能会影响实验效果。
3.操作时戴好手套,避免外源污染。
4.检测细胞上清时,应离心去除细胞,避免细胞内ATP影响实验结果造成读数偏高。
5.该产品仅供科研使用,不得用于诊断或临床实验。