细胞合成培养基的配制步骤及注意事项 虽然各种培养基的组成各有不同,但商品化的干粉型培养基的配制方法大同小异。以往实验室自购各个组分,称量后再按一定顺序进行溶解配制的老方法,一方面需购置大量各种各样的成分,而且每种成分用量很少,很难控制和统一;另一方面要精确称量,顺序溶解,步骤繁琐,质量难以保证。因此,自行配制培养基的方法除了因需要而专门配制一些特殊培养基外,大部分已不再使用。
动物细胞培养4大常用合成细胞培养基 合成培养基是对细胞体内生存环境中各种已知物质在体外人工条件下的模拟。这种模拟不是被动的、不加选择的。而是在体外反复实验和筛选,进行强化和重新组合后形成的人工合成培养基。合成培养基种类很多,据报道已有数十种,每种合成培养基最初都是为培养某种细胞而设计的,但应用后发现其他细胞也可以生长或经改良也适合其他细胞的生长。
动物细胞分离培养实验转移液体的基本要求 移液器(加样器),俗称移液枪,用干吸取移动液体或滴加样品,移液枪可根据需要调节量的大小,吸量准确、方便。特别是微量移液枪,可保证实验样品或试剂取量精确,重复性好。当前,有可高温消毒、多通道的各类移液枪供使用者选择,能确保移液准确、快速、方便且达到无菌要求。
细胞生长缓慢的两大原因 就一个实验室而言无论运作的多么好,总会因为革新技术或拓展方向二影响原来的流程,从而产生各种各样的问题。有些地方错误的操作有可能带来严重的后果,那么今天主要列举细胞生长缓慢的两大原因。
肿瘤细胞的特征 从肿瘤分离细胞可以产生几种不同类型的细胞系。除肿瘤细胞、结缔组织的成纤维细胞、血管的内皮细胞和平滑肌细胞外,浸润的淋巴细胞、粒细胞和巨噬细胞以及形成肿瘤的正常组织成分都能移植存活。尽管已从小细胞肺癌获得造血细胞系,但造血细胞很少形成细胞系。如果没有合适的生长因子和选择培养液,平滑肌细胞不容易扩增,故培养肿瘤细胞的主要潜在污染细胞是成纤维细胞、内皮细胞和肿瘤细胞的正常等同细胞。
细胞培养基需要更换的4个指标 无论是原代培养还是细胞系的传代培养,一旦培养开始,就要定期更换培养基或“饲养”,如果细胞增殖。随后迟早要进行传代培养。对干不增殖的培养物,也需要定期更换培养基,因为细胞仍会代谢,培养基的某些成分会耗尽或自然降解细胞传代间隔在不同细胞系中因生长速率和新陈代谢的不同而不同。
培养细胞中三大消化液详细介绍 消化液常在贴附型细胞原代培养或传代培养过程中用来分散组织或细胞团,以达到离散细胞,获得细胞悬液的目的。目前常用的消化液主要有胰蛋白酶消化液、胶原酶消化液以及乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)液。