2V6.11(人胚肾细胞)

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SKU: SNL-249 分类: 标签: 规格: 1×10⁶cells/T25培养瓶

一、2V6.11细胞基本属性

细胞名称 2V6.11(人胚肾细胞)
细胞别称
细胞货号 SNL-249
来源 胚肾;5型腺病毒及SV40转化;女性;胚胎
细胞形态 上皮细胞样
细胞类型 转化细胞系
生长特性 贴壁细胞
收录 ATCC
生物安全等级 2
致瘤性
培养条件 DMEM+10% FBS+1% P/S
培养环境 空气,95% ; 二氧化碳 (CO2),5%
细胞简介 2V6.11细胞是2001年从人胚肾细胞株293 [HEK-293]衍化而来,293 [HEK-293]细胞用携带Zeocin-抗性标记的质粒pVgRXR转染得到293pVgRXR细胞。随后,用包含编码E4 24K的Ad5 E4ORF6基因的质粒pEKORF6转染。pEKORF6从包含潮霉素抗性基因的质粒pIndHydro衍生而来,载体包含SV40病毒序列。2V6.11细胞株最初从含潮霉素的培养液中用克隆环分离单克隆得到。2V6.11细胞诱导表达的人腺病毒E4,可通过免疫印迹法检测到34KDa蛋白;2V6.11细胞可以用作研究腺病毒E4癌基因的工具。

二、2V6.11细胞培养操作

换液周期 2-3天
培养基体积 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法 1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

三、2V6.11细胞冻存操作

冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格 200-300万/ml,1ml每管
冻存方法 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

Tips:1.细胞贴壁较弱,消化时间偏短,注意控制消化时间; 2.T25瓶细胞发货易漂浮成团,收货若成团按收货处理规定进行; 3.细胞培养时可能会有部分黑点,属正常现象,具体原因参见培养操作说明2、3条; 4.细胞传代容易成团聚集,注意尽量吹散细胞;

我们推荐使用尚恩生物 人胚肾细胞专用培养基(产品货号:SNLM-249)作为2V6.11(人胚肾细胞)的专用培养基。

2V6.11(人胚肾细胞)收货处理方式

2V6.11(人胚肾细胞)培养操作说明

2V6.11(人胚肾细胞)售后规定