A9(小鼠皮下结缔组织细胞)

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SKU: SNL-241 分类: 标签: 收录: ATCC培养基: DMEM来源: 皮下结缔组织;自发永生;雄性;C3H/An规格: 1×10⁶cells/T25培养瓶

一、A9细胞基本属性

细胞名称 A9(小鼠皮下结缔组织细胞)
细胞别称 A9; A9 (Hamprecht); A9(Hamprecht); AG 9; GM00346; GM-346; GM346
细胞货号 SNL-241
来源 皮下结缔组织;自发永生;雄性;C3H/An;100日龄
细胞形态 成纤维细胞样
细胞类型 正常细胞
生长特性 贴壁细胞
收录 ATCC
生物安全等级 1
致瘤性 Yes, in nude mice.
培养条件 DMEM+10% FBS+1% P/S
培养环境 空气,95% ; 二氧化碳 (CO2),5%
细胞简介 A9细胞是从野生型细胞株L中分离得到的衍生系,A9细胞对HAT选择培养基敏感,缺乏腺苷磷酸核糖基转移酶(APRT)和次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT),A9细胞对8-氮鸟嘌呤(0.003mg/ml)和6-硫代鸟嘌呤(0.1mM)有抗性。

二、A9细胞培养操作

换液周期 2-3天
培养基体积 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法 1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

三、A9细胞冻存操作

冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格 200-300万/ml,1ml每管
冻存方法 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

Tips:1.细胞贴壁较弱,消化时间较短,注意控制消化时间; 2.细胞冻存难度较高,建议使用90S+10%DMSO冻存液配方冻存;

我们推荐使用尚恩生物 小鼠皮下结缔组织细胞专用培养基(产品货号:SNLM-241)作为A9(小鼠皮下结缔组织细胞)的专用培养基。

A9(小鼠皮下结缔组织细胞)收货处理方式

A9(小鼠皮下结缔组织细胞)培养操作说明

A9(小鼠皮下结缔组织细胞)售后规定